这是一个基于细胞的定制报告系统，旨在让研究人员能够研究同源重组他们选择的细胞系中的信息（HR）。该套件使用 GFP 作为 HR 通路的体内读数，并包括适当的控制以在您自己的实验室中设置系统。由于该系统依赖于吸收报告基因和效应基因（分别为 HR-GFP 和 I-Sce1）的细胞池，因此该系统可以\"托管”在任何感兴趣的细胞中。唯一的限制是转染效率。无需进行耗时且费力的细胞系克隆和开发……您只需转染并让系统在 48 小时内进行 HR 处理即可。简单！

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动物细胞中的 DNA 修复途径可分为两大类：HR 和 NHEJ。HR 或同源重组是次要途径，但对于保护细胞免受基因毒性非常重要。该过程也有两个关键要求：同源序列，通常在 DNA 复制后，当基因组处于 4N 和 S 期时可用。特定的 HR DNA Reporter 系统对于抗癌药物发现项目非常有益，可以更多地了解 DNA 同源重组修复的过程并建立交叉途径和可药物化途径目标。HR 的细胞环境可提高结果的生理相关性。

HR DNA 报告试剂盒包含测量细胞系中同源重组修复（HR，也称为基因转换）所需的试剂。它包括带有可选择标记的 HR-GFP 报告基因和用于启动 HR 的 DS DNA 切割核酸酶。由于 GFP 是中性基因报告基因并且不受选择影响，因此通过评估细胞群中的 %GFP 或 GFP 强度，可以轻松检查和分析 HR 过程。该系统是可移动的，因为它可以合并到任何细胞谱系或物种中，以适应研究人员的研究系统。

这种移动瞬时检测 DNA 修复系统的设计目的是让研究人员能够询问 HR 过程在体内的活细胞中。该试剂盒基于双 GFP 盒，可使用同源重组 (HR) 将 GFP 阴性细胞转化为 GFP 阳性细胞。为了开始 HR 过程，我们在 5\' 盒 1 的 GFP 基因座中使用大型核酸内切酶 (I-Sce1) 引入精确的 DNA 切割。基因组不包含 I-Sce1 位点；因此，盒 1 中的 I-Sce1 位点意味着 DS 断裂仅发生在该精确位置，而不是其他位置。 DS 断裂启动 HR，并使用 WT 序列作为同源模板（位于 3\' 盒 2 中），基因转换为 WT，并出现 GFP 阳性细胞。综上所述，HR触发DS 断裂是通过激活 I-Sce1 的表达质粒来实现的（图 2）。

该技术适用于活细胞成像（通过跟踪单个 GFP+ 细胞）。实时成像为这些细胞中的 HR 分析提供了基本的单细胞分辨率。此外，可以追踪 DNA 修复的后代，因为这些细胞也是 GFP 阳性的。请观看此视频，了解有关实时成像的更多详细信息。

试剂盒在干冰或湿冰上运输，或者在某些情况下可以在环境温度下运输。所有试剂在收到后均应储存在 4°C（短期）或 -20°C（长期）下。

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